建立了高效液相色谱法分离茶碱和对乙酰氨基酚双组分体系的最佳条件是：C18色谱柱(250 mm×4.6mm，5μm，120)，以十八烷基键合硅胶为固定相；流动相为0.01mol/L磷酸二氢钾溶液(用磷酸溶液调节pH至3.05) (A)-甲醇(B)(体积比为80∶20)；检测波长为245nm和270nm；流速为1.0mL/min；柱温为25℃；进样量为20μL。实验结果表明：对乙酰氨基酚回归方程为y=0.6511x+6.6104，R2=0.9945；茶碱回归方程为y=0.9392x-5.5751，R2=0.998，他们的线性范围是5～500μg/mL。该方法为茶碱、对乙酰氨基酚双组分体系研究提供依据，为其溶解度的测定提供方法支撑，作为高效液相色谱分离方法，分析快速，灵敏度高，重现性好。